一、Tamm-Horsfall蛋白与泌尿系疾病的关系（论文文献综述）
路鑫[1]（2021）在《排石清对大鼠泌尿系感染性结石防治效果的实验研究》文中研究说明目的:在临床泌尿外科当中,较为多见的疾病之一便是泌尿系结石,其中感染性结石是泌尿系结石中风险较大的结石类型,严重影响着患者的生命安全。单纯的手术治疗虽然结石的清除率较高,但术后存在容易复发的风险,而现有的术后预防治疗措施均有着一定的弊端。针对目前的情况,我们基于中医药的理论知识并结合临床特点,组成了此次用于泌尿系感染性结石方剂排石清,在临床一段时间的使用过程中,反馈出了不错的效果。本研究进一步系统评价排石清在防治感染性结石的效果,并初步探索其作用机制,旨在为排石清的临床应用提供一个有力的实验数据支撑和理论依据。方法:采用随机对照实验,将60只大鼠按12只一组随机分成5组,分别为:空白组A、对照组B、动物饮用水组C、排石清低剂量组D和排石清高剂量组E。通过手术将带菌异物置入大鼠膀胱内引发感染,复制感染性结石模型,在给予排石清方剂灌胃20天之后,对大鼠进行解剖,留取血液、尿液以及膀胱组织的标本,测量相关生化指标,观察膀胱内壁粘膜形态,并进行结石成分分析,从而评估排石清药物对感染性结石的防治效果,并根据测量指标的变化,对排石清药物的作用机制做出一个初步的推论。结果:五组大鼠尿液中尿隐血的差异具有显着意义（p<0.05）,从尿隐血++和+++两项之和的占比率（即尿隐血阳性程度）来看,C组、D组、E组尿隐血阳性程度的降低较B组均具有显着差异（p<0.05）,E组尿隐血阳性程度的降低较C组和D组具有显着差异（p<0.05）。五组大鼠尿液中尿白细胞含量的差异具有显着意义（p<0.05）,从尿白细胞++和+++两项之和的占比率（即尿白细胞阳性程度）来看,C组、D组尿白细胞阳性程度的降低较B组和C组具有显着差异（p<0.05）。五组大鼠尿液中尿蛋白含量的差异具有显着意义（p<0.05）,从尿蛋白+++和++++两项之和的占比率（即尿蛋白阳性程度）来看,C组、D组尿蛋白阳性程度的降低较B组具有显着差异（p<0.05）,D组尿蛋白阳性程度的降低较C组具有显着差异（p<0.05）。五组大鼠尿液中尿亚硝酸盐的差异无显着意义（p>0.05）,五组大鼠尿液中尿PH值的差异具有显着意义（p<0.05）,C组、D组、E组尿PH值的差异较B组无显着意义（p>0.05）。五组大鼠尿液中尿比重的差异具有显着的意义（p<0.05）,D组尿比重的降低较B组和C组具有显着差异（p<0.05）,E组尿比重的升高较B组和C组具有显着差异（p<0.05）。五组大鼠尿液中Mg离子浓度的差异具有显着意义（p<0.05）,C组、D组、E组尿Mg离子浓度的差异较B组无显着意义（p>0.05）。五组大鼠尿液中Ca离子浓度的差异具有显着意义（p<0.05）,C组、D组尿Ca离子浓度的降低较B组具有显着差异（p<0.05）。五组大鼠尿液中P离子浓度的差异具有显着意义（p<0.05）,E组尿P离子浓度的升高较B组、C组、D组具有显着差异（p<0.05）。五组大鼠血清Ca离子浓度的差异具有显着意义（p<0.05）,C组、D组、E组血清Ca离子浓度的降低较B组具有显着差异（p<0.05）,D组血清Ca离子浓度的降低较C组具有显着差异（p<0.05）。五组大鼠血清Mg离子浓度的差异具有显着意义（p<0.05）,C组、D组、E组血清Mg离子浓度的差异较B组无显着意义（p>0.05）。五组大鼠血清P离子浓度的差异具有显着意义（p<0.05）,D组血清P离子浓度的降低较B组具有显着差异（p<0.05）。五组大鼠血清二氧化碳含量的差异具有显着意义（p<0.05）,C组、D组血清二氧化碳含量的降低较B组具有显着差异（p<0.05）。结论:1.排石清方剂的治疗可以降低大鼠尿隐血和尿白细胞的阳性程度,进而降低大鼠泌尿系感染的程度。2.排石清方剂的治疗亦可降低尿液中钙离子的浓度、血清中钙离子、磷离子浓度和血清二氧化碳的含量,进而降低大鼠感染性结石的发生概率。3.低剂量排石清方剂治疗还可降低大鼠尿蛋白阳性程度,一定程度上减少肾脏的损伤。
方道成[2]（2020）在《乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall蛋白表达的影响》文中研究表明目的:利用纳米细菌人工造模大鼠肾结石模型,探讨乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall蛋白（THP）表达的影响。并借此讨论乌梅提取物用于预防大鼠肾结石形成的可能,为肾结石的预防和治疗提供新的临床思路。方法:收集10例来自本院实施泌尿外科手术患者的肾结石（排除感染、内分泌疾病、多系统结石等疾病）,将肾结石经过去矿物质、中和、洗涤、再碾碎、离心、滤过、培养等过程,最后经PCR反应鉴定为肾结石来源的纳米细菌,获得纳米细菌混悬液。将45只SD雄性大鼠进行预饲养后随机分为空白组、对照组和实验组各15只。对照组和实验组尾静脉注射纳米细菌混悬液1m L制备大鼠肾结石模型,空白组大鼠尾静脉注射等量生理盐水。实验大鼠于第2天灌胃1m L乌梅提取物进行干预,空白组和对照组灌胃等量生理盐水。连续干预4周后,用代谢笼收集24小时尿液。检测尿液p H、Ca2+、柠檬酸（CA）和草酸（Oxa）的含量;采用ELISA试剂盒测定尿液中THP表达量;取肾脏组织HE染色,观察组织的病理变化以及肾组织中钙盐结晶形态和结晶量,并进行钙盐结晶量化评分。结果:与空白组相比,对照组肾脏组织中钙盐结晶积分（3.80±0.77）显着升高（P<0.05）,尿液中p H值（5.75±0.21）和CA水平（4.17±1.49μmol/L）显着下降（P<0.05）,Ca2+（3.11±0.16mmol/L）、Oxa水平（210.14±20.97μmol/L）和THP（61.63±3.83mg/L）表达显着升高（P<0.05）,HE染色显示肾小管严重损伤、萎缩,肾小管周围组织炎细胞浸润性。肾间质内可见草酸钙结晶形成,与钙结合呈褐色;与对照组相比,实验组肾脏组织中钙盐结晶积分（2.60±0.51）显着下降（P<0.05）,尿液中p H值（6.66±0.13）和CA水平（37.58±3.99μmol/L）显着升高（P<0.05）,Ca2+（2.73±0.18mmol/L）、Oxa水平（175.84±12.87μmol/L）和THP（56.27±3.13mg/L）表达显着下降（P<0.05）,HE染色显示肾小管灶性损伤、萎缩,灶性炎细胞浸润性,肾小管内可见少量褐色晶体沉积。结论:乌梅提取物可能通过降低纳米细菌致肾结石大鼠中THP表达和自身聚合,抑制肾脏组织中草酸钙结晶的形成。
张坚[3]（2020）在《现阶段膀胱结石成分及危险因素分析》文中研究指明目的:探讨现阶段膀胱结石成分特点和分析膀胱结石疾病产生的危险因素,为现阶段膀胱结石疾病的预防、治疗和抑制复发等方面提供参考依据。方法:回顾性分析2017年9月至2018年7月期间南华大学附属第一医院收治的膀胱结石患者90例,进一步根据样本量计算原则,最终确定87例为膀胱结石疾病研究组,并随机选取同期泌尿外科收治的无泌尿系结石的其他疾病患者87例作为对照组,所有研究对象均符合相应的纳入标准和排除标准,并均取得患者知情和签署知情同意书,研究对象的所有基本资料和相关信息均由受过专门培训的专业技术人员进行信息采集,分析研究对象的姓名、年龄、性别、身高、体重、居住地、职业、每日饮水量、盐摄入量、活动量、伴发泌尿系感染、高血压病、下尿路疾病史及家族疾病史等信息,以及膀胱结石患者晨空腹血液样本和24h尿液样本,分析血清中甘油三酯、总胆固醇、尿酸、血钙浓度和尿液中钙、钾、钠、氯、镁和磷浓度;将收集的膀胱结石标本,采用红外光谱法进行成分分析,进一步将研究对象的血清和尿液代谢指标、年龄、体重指数、每日饮水量、每日盐摄入量、活动量、伴发泌尿系感染、高血压病、下尿路疾病史和家族史等因素进行单因素/多因素Logistic回归分析,探讨现阶段膀胱结石发病的危险因素和保护因素。结果:本组共纳入膀胱结石患者90,其中男性87例,女性3例,男性发病率显着高于女性,考虑女性膀胱结石的医源性特征,不具有结石的代表性。（1）在进一步研究的87例膀胱结石中,膀胱结石成分主要有一水草酸钙、碳酸磷灰石和无水尿酸3种单一成分结石,占比分别为13.79%、8.05%、2.30%;而混合成分结石有10种,分别是一水草酸钙+二水草酸钙混合、碳酸磷灰石+一水草酸钙混合、碳酸磷灰石+二水草酸钙混合、无水尿酸+一水草酸钙混合、尿酸铵+一水草酸钙混合、无水尿酸+二水磷酸氢钙混合、尿酸铵+无水尿酸混合、碳酸磷灰石+六水磷酸镁铵混合、碳酸磷灰石+一水草酸钙+二水草酸钙混合、碳酸磷灰石+六水磷酸镁铵+一水草酸钙混合,占比分别为:14.94%、10.34%、3.45%、5.75%、3.45%、2.30%、3.45%、4.60%、21.84%、5.75%。（2）经分析,膀胱结石可分为四种结石成分类型,包括草酸钙类,约占79.31%;碳酸钙类,约占54.02%;尿酸类,约占17.24%;磷酸铵镁类,约占10.34%。经统计学分析,4种类型膀胱结石中草酸钙类、碳酸钙类和尿酸类60岁以下发生率稍低于60岁以上,差异无统计学意义（P>0.05）;磷酸铵镁类60岁以下明显低于60岁以上,差异存在统计学意义（P<0.05）。（3）单因素分析结果显示,研究组与对照组的尿钙、尿钠、尿镁、年龄、BMI、居住地、职业、文化程度、每日盐摄入量、饮水量、活动量、结石家族疾病史、伴发泌尿系感染、高血压病、下尿路疾病等进行对比,差异均有统计学意义（P<0.05）。（4）以单因素分析结果中有统计学差异的因素为自变量,以膀胱结石发生为因变量,采取多因素Logistic回归分析发现,在95%可信区间内,OR值>1,说明高尿钙、高尿钠、高尿镁、年龄≥60岁、BMI≥27Kg/m2、有泌尿系结石家族史、每日盐摄入量≥6g、伴发下尿路疾病、代谢性疾病、泌尿系感染和高血压病是导致膀胱结石发生的独立危险因素（P<0.05）;OR值<1,说明饮水量多、活动量多为膀胱结石的保护因素（P<0.05）。结论:现阶段膀胱结石的主要成分类型为草酸钙类,膀胱结石疾病发生的危险因素主要包括高尿钙、高尿钠、高尿镁、年龄≥60岁、肥胖、有泌尿系结石家族史、每日盐摄入量≥6g、伴下尿路疾病、代谢性疾病、泌尿系感染和伴高血压病;而饮水量多、活动量多为膀胱结石发病的保护因素。
张家模,张翾,罗华铭,赵涛,陈江川,刘娟,王科[4]（2020）在《输尿管支架细菌生物膜观察及病原菌分布和耐药性》文中指出背景:输尿管支架被广泛用于肾盂输尿管交界处狭窄、原位尿流改道重建、输尿管或肾镜碎石、肾移植和肿瘤等泌尿系疾病,但长期留置输尿管支架可导致导管相关性尿路感染等并发症。目的:观察输尿管支架表面细菌生物膜的形态学特点,分析细菌生物膜的病原学分布特征及耐药性。方法:收集2016年1至12月重庆医科大学附属永川医院127例患者的输尿管支架标本,扫描电镜观察支架表面细菌生物膜的形态学特征,刚果红培养基分别筛选肾盂段、输尿管段和膀胱段支架的细菌生物膜菌株,同时进行尿培养,对检出的病原菌进行药敏试验分析。实验获得重庆医科大学附属永川医院伦理委员会批准,批准号:2014年科伦审22号。结果与结论:①在留置7,15,30d的输尿管支架表面均能够观察到细菌生物膜及数量不等的炎性附着物或结晶体,细菌生物膜的细菌被大量纤维膜包裹;留置7,15 d的输尿管支架表面可见呈片状散在分布的菌落,以杆菌为主;留置30 d的输尿管支架表面可见呈堆状分布的菌落,以球菌、杆菌为主;②127份输尿管支架标本中检出细菌生物膜106份,阳性率为83.5%,其中膀胱段阳性率最高,其次为肾盂段和输尿管段;尿培养阳性为25份,阳性率为19.7%,尿液培养的细菌生物膜阳性率明显低于输尿管支架培养结果（P <0.05）;③106份阳性标本中检出细菌227株,其中革兰阴性菌株数显着高于革兰阳性菌株数（P <0.05）;输尿管支架细菌生物膜和尿培养细菌均主要以大肠杆菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌和屎肠球菌最为常见;④输尿管支架管表面细菌生物膜菌株的耐药率高;⑤结果表明输尿管支架细菌生物膜是诱发导管相关性尿路感染的重要因素。
李心[5]（2019）在《云南彝族人群特发性低枸橼酸尿症与VDR基因SNP的关联研究及VDR基因甲基化检测》文中进行了进一步梳理目的探讨维生素D受体（Vitamin D receptor,VDR）基因单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism,SNP）位点 rs2228570、rs7975232、rs731236、rs1544410、rs10783218、rs3847987与云南彝族人群特发性低枸橼酸尿症（Idiopathic Hypocitraturia,IH）的关系及其临床意义和VDR基因甲基化程度检测实验。方法选择云南彝族302例IH患者和258例正常尿枸橼酸者为对照组,通过SNaPshot 技术检测 VDR 基因 SNP 位点 rs2228570、rs7975232、rs731236、rs1544410、rs10783218、rs3847987,并分析其与云南彝族IH之间的相关性。收集云南彝族5例样本提取血液中目的基因DNA（2例对照,3例结石病例）进行了 VDR基因三个片段预实验Sequenom MassARRAY质谱甲基化检测并分析结果。结果在VDR基因SNP位点的基因型Hardy-Weinberg平衡检验中,六个位点的实际频率与预计频率之间的差异有统计学意义（P>0.05）。云南彝族302例含钙肾结石IH患者尿枸橼酸含量平均为（245.36±36.63）mg/24h,云南彝族258例尿枸橼酸值正常者尿枸橼酸含量平均为（590.28±123.68）mg/24h,差异具有统计学意义（P<0.05）。云南彝族IH病例组与对照组之间,VDR基因SNP位点rs7975232、rs731236和位点rs2228570的基因型频率差异具有统计学意义（P<0.05）,且在IH病例组中rs7975232的AA基因型较对照组多见,rs731236的CC基因型较对照组多见,rs2228570的TT基因型较对照组多见。在两组受检者的24 h尿枸橼酸含量中,rs7975232的AA基因型为（365.71±195.23）mg/24h,明显低于 rs7975232 的 CC、CA 基因型者[（507.67±197.42）、（485.55±180.15）mg/24h,P<0.05]。rs731236 的 CC 基因型为（366.92±186.43）mg/24h,明显低于 rs731236 的 CC、CT基因型者[（505.47±196.02）、（488.95±191.95）mg/24h,P<0.05],rs2228570 的 TT 基因型为（363.92±185.43）mg/24h,明显低于 rs2228570的 CC、CT 基因型者[（506.47±198.02）、（485.95± 190.95）mg/24h,P<0.05]。VDR基因第一段（VDR Ⅰ）样品20号（对照）、109号（病例）呈完全非甲基化状态;样品22号（对照）、124号（病例）、158号（病例）呈不完全甲基化状态,其中158号病例在该检测区段的甲基化现象明显。VDR基因第二段（VDR Ⅱ）、基因第三段（VDR Ⅲ）5个样品该检测区段呈完全非甲基化状态,样品间甲基化程度无差异。结论云南彝族IH与VDR基因SNP位点rs7975232、rs731236和rs2228570的SNP间存在遗传相关性,VDR基因位点位点rs7975232的AA基因型、rs731236的CC基因型和rs2228570的TT基因型有望成为云南彝族IH的候选基因。VDR基因的甲基化程度在5个样品间有差异,158号样品（病例）甲基化程度高于其它样品,甲基化差异区域在检测的第一区段,为之后研究结石病人中VDR基因甲基化提供方向。
刘鑫[6]（2017）在《大鼠肾结石模型肾组织中自噬相关蛋白、自噬体及尿液中Tamm-Horsfall蛋白的检测与意义》文中研究表明目的:在建立钙化性纳米微粒（Calcifying Nanoparticles CNPs）大鼠肾结石模型的过程中,通过检测肾结石形成过程中不同时间组肾脏组织中自噬相关蛋白Beclin-1、LC-3的表达水平和自噬体的数量变化,测定不同时间组大鼠尿液中Tamm-Horsfall蛋白（THP）的变化和肾脏组织的病理改变以及钙盐晶体形成情况,对CNPs致肾结石形成机制进行初步探讨。方法:利用肾结石患者术中取出的结石标本培养出CNPs,制成CNPs混悬液。48只SD大鼠随机分为CNPs实验组（A组）和空白对照组（B组）。实验组通过尾静脉注射CNPs,对照组注射等量的0.9%无菌生理盐水。分别于注射后3h、6h、12h、24h、1w、2w、4w和8w收集大鼠尿液,酶联免疫分析法（ELISA）检测各时间段尿液中THP的含量,同期处死大鼠,取肾脏组织,利用免疫组化及Western印迹检测法（Western-blotting）测定肾脏组织中自噬相关蛋白Beclin-1、LC-3在不同时间组的表达部位与含量。每组制作3个透射电子显微镜标本测定不同时间组自噬体的数量及形态。每组取3个肾脏切片行苏木精-伊红（HE）染色观察细胞的病理改变及对钙盐晶体形成情况进行评分。结果:Western印记检测蛋白结果:在注射CNPs后实验组在不同时间段的肾脏组织中Beclin-1、LC-3的表达较对照组明显增强（P<0.05）,且在实验组中Beclin-1、LC-3的表达强度随时间增强,到24h到达最高值,其后随时间逐渐减弱（P<0.05）。免疫组化结果:Beclin-1、LC-3在肾脏组织中高表达于肾小管上皮细胞,少量表达于肾小球。在注射CNPs后实验组在不同时间段的肾脏组织中表达Beclin-1、LC-3蛋白的积分光密度值（IOD）较对照组明显增加（P<0.05）。Beclin-1、LC-3蛋白的IOD随时间增加,到24h到达最高值（Beclin-1:15.33±0.42/Hp;LC-3:9.33±0.12/Hp）,其后随时间逐渐减弱（P<0.05）。透射电子显微镜结果示:自噬体主要位于肾小管上皮细胞内,在自噬体中可观察到被吞噬的CNPs,与实验组3h组自噬体数量（1.17±0.35/Hp）相比较,24h组前各组的自噬体数量（1.47±0.31/Hp）增加缓慢（P>0.05）。24h组后各组自噬体数量（2.83±0.32/Hp）增加显着,观察期内第8w自噬体的数量（4.70±0.51/Hp）达到最多（P<0.05）。对照组中观察到少量自噬体。自噬体数量与钙盐晶体评分行Pearson相关性分析,相关系数r=0.902（P<0.05）。酶联免疫分析法结果:实验组与对照组相比较,注射CNPs后,实验组各组的大鼠尿液中THP含量与对照组各组相比较,明显高于对照组（P<0.05）;与实验组中3h组THP含量（165.89±2.23pg/mL）相比较,24h前各组THP含量（166.03±3.02pg/mL）增加缓慢（P>0.05）,24h后各组THP含量明显增加,在观察期内第8w THP含量（177.11±1.76pg/mL）达到峰值（P<0.05）。实验组THP含量与钙盐晶体评分行Pearson相关性分析,相关系数r=0.843（P<0.05）。肾组织苏木精-伊红染色结果示:随着时间延长,实验组大鼠肾小管上皮细胞水肿逐渐加重,在24h最严重且伴部分上皮细胞空泡变性,在1w至8w镜下可观察到部分肾小管上皮细胞颗粒样变性,肾小管管腔内有钙盐结晶体形成,肾小球无明显的病理改变。对照组肾脏组织无明确的病理改变。在实验组中与6h组钙盐晶体评分（1.0分）相比较,1w前各组的钙盐晶体评分（2.0分）增加缓慢,2w后钙盐晶体评分增加显着（3.0分）,观察期内第8w钙盐晶体评分最高（6.7分）（P<0.05）。结论:钙化性纳米微粒可损伤肾小管上皮细胞,使细胞发生明显的急性炎症改变,伴随自噬蛋白的急剧增加,到后期随着细胞炎症反应逐渐减轻,自噬蛋白水平逐渐减弱,肾小管管腔内有钙盐晶体形成。自噬蛋白与肾小管上皮细胞损伤程度成平行关系。钙化性纳米微粒感染大鼠后即刻诱导细胞自噬活动,自噬体数量逐渐增加,自噬体与钙盐晶体的形成成正相关关系。大鼠感染钙化性纳米微粒后尿液中的Tamm-Horsfall蛋白含量逐渐增加,且钙盐晶体评分与Tamm-Horsfall蛋白含量成正相关关系。
肖观称[7]（2014）在《骨桥蛋白基因多态性与特发性草酸钙结石的相关性研究》文中研究指明目的：探讨骨桥蛋白（osteopontin，OPN）基因多态性与江西赣南地区特发性草酸钙结石（idiopathic calcium oxalate stones，ICS）的相关性。方法：收集2012年7月至2013年12月江西赣南地区218例ICS患者（ICS组）和同期187例正常人群（对照组）外周血液及部分研究对象尿液标本。采用Logistic回归模型分析ICS形成的影响因素，如年龄、性别、身体质量指数（bodymass index，BMI）以及尿液和血液生化指标等；实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction，Real-time PCR）TaqMan-MGB探针法检测OPN基因rs6840362、rs6532040和rs11439060位点单核苷酸多态性（singlenucleotide polymorphism，SNP），分析OPN基因型和单体型与ICS的相关性。结果：单因素分析显示，ICS组BMI和尿液钙离子浓度显着高于对照组，而尿液PH值和每日液体摄入量显着低于对照组（P<0.05）。进一步对上述影响因素行Logistic回归分析，发现尿液钙离子浓度在两组间的差异仍具有统计学意义（P=0.000）。两组人群中，OPN基因三个位点基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。rs11439060位点，ICS组和对照组delG、G等位基因频率分别为:69%、31%和57%、43%，差异具有统计学意义（P=0.000）；ICS组和对照组delGdelG、delGG和GG基因型频率分别为45.9%、46.3%、7.8%和32.1%、49.7%，18.2%，以GG基因型为参照，两组间delGdelG和delGG基因型差异有统计学意义（P=0.000，OR=3.333，95%CI=1.7156.478和P=0.017，OR=2.172，95%CI=1.1384.147）。rs6840362位点，ICS组和对照组C、T等位基因频率分别为:91.7%、8.3%和95.7%、4.3%，差异具有统计学意义（P=0.021）。rs6532040位点，ICS组和对照组A、G等位基因频率分别为:90.1%、9.9%和94.4%、5.6%，差异具有统计学意义（P=0.026）。rs6840362和rs6532040位点基因型两组间差异无统计学意义（P>0.05）。各基因型与临床表型的相关性分析，差异无统计学意义（P>0.05）。OPN基因单体型分析显示，C-G-delG单体型与ICS的形成呈正相关（OR=6.326，95%CI=1.95820.442），C-A-G与ICS的形成呈负相关（OR=0.600，95%CI=0.4480.804）。结论：1. OPN基因多态性与赣南地区ICS形成显着相关。其中携带rs11439060位点delGdelG、delGG基因型和C-G-delG单体型个体患ICS的风险较高；而携带rs11439060位点GG基因型和C-A-G单体型个体患ICS的风险较低。2.尿液钙离子浓度增加可能是ICS形成的危险因素。
关华伟[8]（2014）在《静脉注射草酸钾对犬肾功能、组织结构及钙转运相关蛋白的影响》文中指出草酸以草酸盐的形式几乎存在于所有植物中,它对动物是一种高毒性化合物,在动物体内蓄积可引起泌尿系统疾病,包括高草酸尿症、肾结石、急性肾损伤等。统计显示,罹患尿路结石的犬猫中其结石成分为草酸钙或磷酸铵镁的约占85%,欧美地区1981～2008年间,犬猫鸟粪石结石发病率逐渐下降,但草酸钙结石发病率却显着上升。为研究草酸钙尿结石期间犬肾功能和肾脏组织结构变化,将10只比格犬随机分为两组,每组5只。按体重（0.13mL/kg）经头静脉对试验组犬每天注射草酸钾溶液（0.5mol/L）,对照组犬注射等剂量的生理盐水,每天3次,连续注射7天。观察犬的临床表现,实验前后采集肾脏超声图像,每天采集的血清用于生化检查,尿液用于尿沉渣检查；在最后一次注射8h后,用手术方法采取肾脏,通过制作组织切片观察其病理组织结构、结晶沉积部位以及通过电镜观察其超微结构的变化；并通过免疫组织化学发和荧光定量PCR法检测草酸钙结石犬肾中TRPV5、NCX1、Calbindin-D28k蛋白和mRNA表达变化。试验结果如下：试验一：与对照组相比,试验组犬肾肿大,表面有点状出血灶。组织切片钙盐染色可见肾小管中有大量结晶沉积；X线能谱分析结果显示,肾小管中沉积的结晶成分为草酸钙；超声图像显示皮质回声增强,皮髓界限模糊；血清生化检查结果表明,血清中尿素氮和肌酐水平逐渐上升,第5、6、7d时差异性显着（P<0.05）,其余指标未见明显变化。试验二：对照组肾脏组织切片显示,肾小球血管袢结构清晰,肾小管排列整齐,超微结构显示,肾小球毛细血管有空内皮结构清晰,足细胞足突完整。而试验组巾组织切片显示,肾小球呈不同程度的破坏,间质内有炎性细胞浸润,髓质肾小管有大量被染为紫红色的蛋白填充。超微结构可见,足细胞核皱缩、足突排列紊乱,有明显融合现象；肾小管上皮细胞中线粒体脊断裂、双层膜结构消失。部分肾小管上皮细胞浆中可观察到结晶阴影以及皱缩的细胞核。胞质空泡化部分细胞器泄露到管腔。试验三：犬肾组织免疫组织化学染色染色结果显示,对照组中TRPV5、NCX1、 Calbindin-D28k阳性率要强于试验组巾TRPV5、NCX1、Calbindin-D28k阳性率。荧光定量PCR结果可见对试验组中TRPV5、NCX1、Calbindin-D28k mRNA表达量均有不同程度降低。TRPV5mRNA表达量降低,但差异性不显着,NCX1mRNA表达显着下降（P<0.05）。Calbindin-D28k mRNA表达量降低,差异极显着（p<0.05）。结论：（1）通过静脉注射草酸钾的方法建立犬肾脏草酸盐沉积模型效果良好,干扰因素少。（2）草酸/草酸钙结晶可对犬肾组织结构和滤过功能造成严重损害。（3）犬肾脏草酸盐沉积模型中肾组织内TRPV5、NCX1、Calbindin-D28k蛋白和1mRNA表达量较正常组低。
院恩萌[9]（2014）在《尿血管紧张素原（uAGT）在儿童梗阻性肾积水中的检测及其意义》文中研究表明背景先天性肾积水是小儿泌尿外科常见病，肾盂输尿管连接部梗阻（Ureteropelvicjunction obstruction,UPJO）是其主要病因。门诊患儿多由其母亲产前行彩超检查发现，其中一部分能维持不变或自行消退，另外一部分会持续扩张，造成肾功能损坏，需限期手术干预，经典术式为离断式肾盂成形术（Anderson-Hynes术）。这样，手术时机的选择就尤为重要，既往我们多通过彩色多普勒超声测量横切面上的肾盂前后径（Anterior-posterior Diameter，APD）来给肾积水分级并决定手术，但此时患儿肾功能可能早已受损，且不完全可逆。本文探讨尿血管紧张素原（uAGT）在梗阻性肾积水患儿尿液中的分布及其意义、与肾功能受损及术后恢复的关系。目的研究梗阻性肾积水患儿尿液中尿血管紧张素原（uAGT）的测定及其与肾功能受损的关系，从而为肾积水患儿术前评价、手术时机选择、术后定期随访提供新的、具体的、快速的参考指标。方法本研究收集了2012年8月-2013年12月在郑州大学第一附属医院小儿外科门诊定期随访或住院接受治疗的单侧先天性肾盂输尿管连接部梗阻肾积水（Congenital hydronephrosis）患儿的病历资料，他们均由彩超、静脉肾盂造影、CT或MRI等影像学方法所确诊。分为手术治疗组、非手术组与对照组。手术治疗组28人，其中男20人，女8人，年龄2月-12岁，均行离断式肾盂成形术，术后病理证实为先天性肾盂输尿管连接部狭窄，连接部粘膜慢性炎症；非手术组20人，其中男12人，女8人，9月-11岁，为确诊肾积水后门诊定期复查，暂无手术指征且肾积水无进行性加重患儿；对照组20人，其中男10人，女10人，4月-13岁，对照组男性为住院鞘膜积液患儿，女性为腹股沟斜疝患儿，均无高血压、糖尿病、慢性肾病、泌尿系感染及其他感染性疾病。收集三组患儿清洁晨尿，其中手术治疗组患儿收集三次，术前一次，术后6周、12周各一次；非手术治疗组收集三次，中间均间隔6周于门诊收集。手术治疗组和非手术治疗组均行放射性核素检查检测分肾功能，手术治疗组于术前和术后12周进行，非手术治疗组门诊复查时间隔12周进行。釆用酶联免疫吸附法（ELISA）测定三组患儿尿中uAGT含量，全自动生化分析仪测定尿肌酐（uCr）含量，放射性核素检查评估肾小球滤过率（GFR），最后将数据进行整理分析。结果三组间性别构成及平均年龄差异均无统计学意义，说明三者性别、年龄比较均衡，样本一致可比。uAGT/uCr值在三组间比较差异均有统计学意义，由SNK-q检验进行两两比较可知，非手术治疗组与对照组间差别无统计学意义；非手术治疗组及对照组uAGT/uCr平均水平与手术治疗组差异均有统计学意义，非手术组及对照组均显着低于手术治疗组。术前及术后uAGT/uCr与GFR做相关性分析，由结果可知二者为负相关关系，即GFR降低时，uAGT/uCr会升高；反之，GFR升高时，uAGT/uCr会降低。对手术治疗组治疗前后GFR变化进行配对样本t检验可知，术后GFR平均水平升高，治疗前后GFR水平差异有统计学意义。结论尿血管紧张素原/尿肌酐（uAGT/uCr）比值在需要手术治疗的先天性UPJO患儿中明显升高，与非手术治疗组和对照组相比有统计学意义；手术治疗组术后12周uAGT/uCr与非手术治疗组相比仍较高；uAGT/uCr在非手术治疗组与对照组之间无统计学意义；尿血管紧张素原与GFR呈负相关，尿血管紧张素原升高可能是小儿梗阻性肾积水肾脏功能损伤的指标。
谷东风[10]（2014）在《尿exosomes的提取和鉴定及其在糖尿病肾病研究中的应用》文中研究说明研究背景2013年10月,诺贝尔生理或医学奖揭晓,美国2位科学家詹姆斯·罗斯曼（James E. Rothman）、兰迪·谢克曼（Randy W.Schekman）和德国科学家托马斯·苏德霍夫（ThomasC.Sudhof）因“发现细胞内的主要运输系统—囊泡运输的调节机制”,而荣获2013年诺贝尔生理学或医学奖。兰迪·谢克曼发现了一系列与细胞囊泡运输机制有关的基因;詹姆斯·罗斯曼发现了让这些囊泡得以与其靶点相融合的蛋白质机制,从而可以实现对所运“货物”的传递;托马斯·苏德霍夫则揭示了信号是如何实现对囊泡的控制,使其得以精确分配其所载“货物”。诺贝尔生理或医学奖奖项的授予,无疑将囊泡的研究推向了新的高潮。作为囊泡的一种,exosomes也受到越来越多的关注。1981年,Trams等在研究正常细胞和肿瘤细胞脱落小体的5’核苷酸外切酶的活性时,发现电镜下存在很多直径约40nm的囊泡,第一次发现了 exosomes。Exosomes是一种胞吞来源的、细胞分泌的粒径约40～100nm大小的膜囊泡,其中含有蛋白、DNA、RNA和脂质等。exosomes起源于内吞的多囊体,由体内各种细胞分泌。细胞经过胞吞作用形成早期内吞小体,早期内吞小体以内生出芽的方式形成多个内生小囊泡,经过内吞分选转运装置的帮助,选择性的接受胞浆内的蛋白质和脂质而形成晚期内吞小体,即多囊体。多囊体或者与溶酶体融合而被降解,或者与质膜融合,释放其中的管内囊泡,即exosomes,进入细胞间隙。Exosomes可以释放进入血液,经过血液循环而发挥作用,也可以进入局部微环境,介导细胞与细胞间相互作用。不同exosomes的功能是由其来源的细胞决定的。树突状细胞来源的exosomes参与免疫调节。病毒能够劫持宿主细胞的exosomal装置,逃避宿主的防御系统,有助于病毒转染。肿瘤来源的exosomes可以转运蛋白、mRNA和miRNA,建立一个癌性装置,有助于血管生成、细胞增生和细胞存活。Exosomes也出现在神经组织退化性疾病的传播中。尿exosomes由肾小管上皮细胞分泌,释放进入尿液,可能携带有肾脏结构和功能损伤的生物标记物。研究发现,尿exosomes中存在肾小球足细胞损伤的标记物如Podocine、podocalyxin和WT1;近曲小管损伤的标记物如megalin、cubilin、aminopeptidase N （APN）、水通道蛋白 1 （water channel aquaporin-1,AQP1）、Ⅳ型碳酸酐酶和γ-谷氨酰转移酶;Henle袢升支粗段损伤的标记物如THP、CD9和2型Na-K-2C1转运蛋白;远曲小管损伤的标记物如Na-Cl cotransporter （NCC）;集合管损伤的标记物如水通道蛋白2 （water channel aquaporin-2, AQP2）、mucin-1、Rh型C糖蛋白;膀胱移行上皮细胞损伤的标记物如uroplakin-1和uroplakin-2。因此,尿exosomes分析能够为每一种泌尿系统上皮细胞的生理的和病理功能提供一个全新的认识。尿液作为一种无损伤的生物标记物来源,越来越受到人们的关注。2009年,第一个exosomes数据库ExoCarta成立,收集了很多关于尿exosomes研究的数据。由于exosomes还是一个新兴的研究领域,数据库还在逐年逐步完善更新当中。2011 年,第一个国际细胞外囊泡协会（International Society for Extracellular Vesicles, ISEV, about Microvesicles, Exosomes, Ectosomes and other Extracelluar Vesicles）成立,这是exosomes研究史上的一个里程碑。近几年,每年都有举行关于尿exosomes研究的国际性学术交流会议。尿exosomes的研究已经应用于泌尿系统疾病,如慢性肾脏病、膀胱癌和前列腺癌等,也有研究报道尿exosomes可用于急性心肌梗死和非小细胞肺癌诊断生物标记物的研究。众所周知,尿液是泌尿系统及身体其他系统疾病检测中的重要标本来源。然而,尿液中含量最多的是Tamm-Hosfall蛋白（Tamm-Hosfall Protein,THP）,THP多聚体能够包绕exosomes,给尿exosomes的提取带来困难。目前,关于尿exosomes提取的技术各个实验室都有自己的标准,但大部分实验技术仍有待于进一步验证,尚未发现有权威的统一的关于尿exosomes处理的标准化操作流程的研究报道。关于尿exosomes的提取技术一般有超速离心法和纳米膜浓缩法,两种方法各有各的优点和不足。文献报道的这两种方法的工作流程大都很复杂,操作起来要花费大量的时间,而且需要配备一些特殊的仪器设备。我们的研究目的是探索尿exosomes的简单有效提取技术,为临床研究提供理论依据和技术支持。糖尿病是全球范围的健康问题,特别是中国。国际糖尿病协会2012年第五版关于糖尿病流行病学资料表明,中国20～79岁糖尿病的患病人数有9230万,排在世界第一位,其次是印度和美国。重要的是一半的糖尿病患者不知道自己患有糖尿病。还有一部分人虽然没有达到糖尿病的诊断标准,但是空腹血糖受损,或者糖耐量异常,被称为糖尿病前期（Prediabetes, PreDM）。糖尿病前期可能已经有了并发症,但是还没有明显的临床表现,或者患者并不知道。根据美国1999～2006年的统计,糖尿病前期慢性肾脏病的患病率已经达到了 17.1%。因此,我们在已经建立的尿exosomes纳米膜浓缩法提取技术的基础上,对糖尿病前期、糖尿病无蛋白尿期、糖尿病肾病微量白蛋白尿期和糖尿病肾病大量蛋白尿期的尿液进行exosomes的富集,与健康对照组进行比较,试图寻找糖尿病前期和糖尿病肾病及其早期肾脏损害的生物标记物,从而为糖尿病肾病的早期诊断和干预提供依据。目的寻找糖尿病前期、糖尿病无蛋白尿期、糖尿病肾病微量白蛋白尿期和糖尿病肾病大量蛋白尿期尿exosomes中的生物标记物。方法1尿exosomes提取技术的优化我们在国内建立了两种尿exosomes提取技术:超速离心法和纳米膜浓缩法。超速离心法的操作步骤是:首先室温下相对离心力（RCF） 2000g离心30分钟,去除细胞碎片、细菌及其他杂质。其后,3.5kDa膜透析,三次更换超纯水,冷室过夜。然后,真空浓缩样品体积至原样品体积的10%。接着室温下RCF 18,000g离心30分钟,去除尿液中的污染蛋白。最后,4℃C RCF 200,000g超速离心2小时,收集尿沉渣并用超纯水重悬。纳米膜浓缩法的操作步骤是:首先,室温下RCF 2000g离心半个小时,去除细胞碎片、细菌及其他杂质。其后,自制lOOOkDa纳米膜浓缩装置,检查性能良好后,纳米膜透析浓缩样品至原体积的10%。待样品浓缩至原体积的10%左右时,加入200ml超纯水,反复冲洗纳米膜,滤过尿液中的可溶性蛋白和黄色微粒。待样品进一步透析浓缩至4～5ml时收集浓缩液。最后,4℃RCF40,000g离心1小时,收集尿沉渣并用超纯水重悬。2尿液exosome标本收集方法的优化留取健康志愿者的晨尿标本,分为15ml组和50ml组,15ml尿液标本又分为添加蛋白酶抑制剂组和不添加蛋白酶抑制剂组,50ml尿液标本又分为添加蛋白酶抑制剂组和不添加蛋白酶抑制剂组,每组各8例。纳米膜浓缩法提取尿exosomes,Bradford考马斯亮蓝法测定尿exosomes的蛋白浓度,比较各组间蛋白浓度的差异。3糖尿病及糖尿病肾病不同阶段晨尿标本的处理从珠海流行病学调查数据库中随机筛选出正常对照组、糖尿病前期、糖尿病无蛋白尿期、糖尿病肾病微量白蛋白尿期和糖尿病肾病大量蛋白尿期共75例社区居民纳入我们的蛋白组学研究,每组各15例。收集晨尿50～100ml,纳米膜浓缩技术提取尿exosomes。4尿exosomes的鉴定Bradford考马斯亮蓝法测蛋白浓度。透射电镜观察尿exosomes的形态分布,纳米颗粒跟踪分析软件观察尿exosomes的布朗运动,形态,粒径和强度。凝胶考马斯亮蓝染色观察疾病不同组的蛋白条带分布。Western blot检测尿exosomes的生成标记物TSG101。5蛋白组学研究技术在糖尿病肾病研究中的应用利用荧光差异凝胶电泳（DIGE）技术分离蛋白质,扫描分析建立图谱,通过DeCyder 2D差异分析软件,分析寻找差异蛋白。挖取与正常对照组相比较,在糖尿病前期、糖尿病无蛋白尿期、糖尿病肾病微量白蛋白尿期和糖尿病肾病大量蛋白尿期具有差异表达1.5倍以上的蛋白质,胶内酶解,进行辅助激光解析离子化-飞行时飞行时间/飞行时间质谱仪（MALDI-TOF/TOF）鉴定,数据库检索,获得这些蛋白质的序列、结构和功能信息,结合文献,对感兴趣蛋白行生物信息学分析。6统计学分析SPSS 13.0 （SPSS Inc., Chicago, IL,USA）统计学软件被用来做统计分析。15ml和50ml添加蛋白酶抑制剂和不添加蛋白酶抑制剂所测得蛋白浓度用均值±标准差表示（μg/ml）,采用析因设计方差分析对所得数据进行方差分析。对所纳入研究人群的性别、年龄、血糖、尿微量白蛋白/肌酐比值、血肌酐和尿素氮所得数据,方差齐时采用LSD法进行方差分析,方差不齐时,采用Welch方法,选择Dunnett’s T3法进行两两比较,计量资料同样采用单因素方差分析（One-Way ANOVA）比较各组间的差异,计数资料采用χ2检验。P<0.05被认为差异具有统计学意义。结果1.与超速离心法相比较,纳米膜浓缩技术提取尿exosomes的操作步骤,具有以下优点:离心次数少,透析除杂简单,浓缩样品快,节约流程时间,普通实验室可操作,可一次性处理大量样品。2.添加和不添加蛋白酶抑制剂对尿exosomes的提取影响不大,差异不具有统计学意义（F=0.828,P<0.001）。50ml尿提取的exosomes蛋白定量显着高于15ml,差异具有统计学意义（F=58.661, P<0.001）。所纳入研究对象的疾病不同阶段的人群空腹血糖（F=28.950, P<0.001）、尿微量白蛋白尿/肌酐比值（F= 161.456, P=0.000）、血肌酐（F=3. 111,P<0.05 ）、尿素氮（F=5.612, P<0.05 ）、年龄（F=11.950,P<0.001）,男性（χ2=32.000, P<0.001）,女性（χ2=43.000,P<0.001）,差异具有统计学意义。3.透射电镜下尿exosomes呈杯状或者椭圆形,分布均匀,粒径大约30～100nm。纳米颗粒跟踪分析软件分析表明,exosomes呈杯状或者椭圆形,分部均匀,布朗运动活跃,exosomes平均粒径55～llOnm。Bradford考马斯亮蓝法测蛋白浓度发现:正常对照组为15.4μg/ml,糖尿病前期为26.56μg/ml,糖尿病无蛋白尿期为51.55μμg/ml,糖尿病肾病微量白蛋白尿期为76.62μg/ml,糖尿病肾病大量蛋白尿期为89.14μg/ml。凝胶考马斯亮蓝染色显示exosomes蛋白条带显着,Western blot检测到exosomes的生成标记物TSG101阳性。4. 2D-DIGE蛋白组学和MALDI-TOF/TOF质谱技术的联合应用,共鉴定出22个差异蛋白,生物信息学分析表明,涉及到蛋白质的生物学功能有催化活性、结合活性、结构活性、酶调节活性、mRNA处理活性、转录调节活性,其涉及的生物学程序有杀伤功能、慢性炎症反应、免疫反应、信号通路、发育功能、细胞外基质的生成功能、造血功能、信号转导功能、分化功能、转运功能、代谢功能。通过蛋白质的生物信息学分析和文献检索,共筛选出4个感兴趣的差异蛋白:甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2 （MASP2）、钙结合蛋白D28k （CALB1）、钙结合蛋白S100A8 （Protein S100 A8）和钙结合蛋白S100A9 （ ProteinS 100 A9）。结论1.本研究确定了纳米膜浓缩技术提取尿exosomes的操作步骤在尿exosomes蛋白组学研究中的应用。2. 50ml晨尿添加或不添加蛋白酶抑制剂均适合于尿exosomes的蛋白组学分析。3.糖尿病在疾病的不同时期分泌的exosomes量是不同的,随着疾病的进展,exosomes的分泌量逐渐增加,exosomes涉及疾病的发病机制和过程。4. MASP2、CALB1、Protein S100 A8 和 Protein S100 A9 可能涉及糖尿病及糖尿病肾病不同时期的转变,是糖尿病疾病进展的潜在生物标记物。创新点经国内外文献检索,尚未发现利用DIGE和MALDI-TOF/TOF质谱技术对糖尿病及糖尿病肾病不同阶段晨尿exosomes进行蛋白组学分析的研究报道。本研究所纳入的研究对象来自于横断面流行病学调查的社区居民,研究结果更加具有科学性。利用DIGE技术分离寻找差异蛋白,重复性和敏感性更好。第一次报道糖尿病及糖尿病肾病不同阶段尿exosomes中MASP2、CALB1、Protein S100 A8和Protein S100A9蛋白表达明显异常。
二、Tamm-Horsfall蛋白与泌尿系疾病的关系（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Tamm-Horsfall蛋白与泌尿系疾病的关系（论文提纲范文）
（1）排石清对大鼠泌尿系感染性结石防治效果的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 理论研究 |
| 1.泌尿系结石的概述及流行病学 |
| 2.泌尿系结石的分类 |
| 2.1 按病因分类 |
| 2.2 按晶体成分分类 |
| 2.3 按部位分类 |
| 2.4 按x线是否显影分类 |
| 3.泌尿系结石的诱因和危险因素 |
| 3.1 代谢的异常 |
| 3.2 尿路的梗阻、感染及异物的影响 |
| 3.3 易成石药物的服用 |
| 4.泌尿系结石的诊断 |
| 4.1 影像学检查 |
| 4.2 实验室检查 |
| 5.泌尿系结石的治疗 |
| 5.1 一般治疗 |
| 5.2 止痛解痉治疗 |
| 5.3 药物排石溶石治疗 |
| 5.4 体外冲击波碎石术(ESWL) |
| 5.5 输尿管镜碎石取石术(URL) |
| 5.6 经皮肾镜碎石取石术(PNL) |
| 5.7 腹腔镜手术和开放性手术 |
| 6.泌尿系结石的中医认知 |
| 6.1 淋证的历史发展 |
| 6.2 淋证的病因病机 |
| 6.3 淋证的分证论治 |
| 7.泌尿系结石防治中排石清的研究思路 |
| 1.实验目的 |
| 2.实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验耗材 |
| 2.3 实验器械 |
| 3.实验方法 |
| 3.1 菌液及异物制备 |
| 3.2 分组 |
| 3.3 造模 |
| 3.4 给药 |
| 3.5 收集 |
| 3.6 检测指标 |
| 3.7 统计学方法 |
| 3.8 技术路线图 |
| 4.实验结果 |
| 4.1 五组大鼠的成石情况及结石成分分析 |
| 4.2 五组大鼠的膀胱组织结构的观察 |
| 4.3 五组大鼠尿液的尿常规分析 |
| 4.4 五组大鼠尿液的尿Mg、尿Ca、尿P离子浓度分析 |
| 4.5 五组大鼠血清的Ca、Mg、P离子浓度和血清二氧化碳含量分析 |
| 5.实验小结 |
| 讨论 |
| 1.研究思路来源 |
| 2.研究讨论 |
| 3.实验不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1.英文符号缩略表 |
| 2.文献综述 泌尿系感染性结石的诊治进展 |
| 参考文献 |
| 硕士期间主要研究成果 |
| 致谢 |
（2）乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 Tamm-Horsfall 蛋白在肾脏疾病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
| 学位论文数据集 |
（3）现阶段膀胱结石成分及危险因素分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 背景与现状 |
| 1.1.1 背景 |
| 1.1.2 结石成分研究现状 |
| 1.1.3 结石发生的因素分析现状 |
| 1.2 研究目的与意义 |
| 1.3 研究创新点 |
| 第2章 资料与方法 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.1.1 样本量计算 |
| 2.1.2 纳入标准和排除标准 |
| 2.1.3 研究对象 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 资料收集 |
| 2.2.2 仪器及材料 |
| 2.2.3 膀胱结石成分分析 |
| 2.2.4 相关指标判定 |
| 2.2.5 膀胱结石发病危险因素分析 |
| 2.3 统计学方法 |
| 2.4 质量控制 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 膀胱结石成分及类型分布 |
| 3.1.1 膀胱结石类型与性别的关系 |
| 3.1.2 膀胱结石成分及分类 |
| 3.1.3 膀胱结石类型与年龄的关系 |
| 3.2 单因素分析 |
| 3.2.1 血、尿代谢项目检测分析 |
| 3.2.2 调查项目单因素分析 |
| 3.2.3 多因素逐步Logistic回归分析 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 膀胱结石成分分析 |
| 4.2 膀胱结石发病的影响因素 |
| 4.2.1 高尿钙 |
| 4.2.2 肥胖因素 |
| 4.2.3 伴随代谢性疾病及遗传因素 |
| 4.2.4 高钠饮食和尿钠高因素 |
| 4.2.5 高龄因素 |
| 4.2.6 伴随泌尿系感染因素 |
| 4.2.7 伴随下尿路疾病因素 |
| 4.2.8 伴高血压病 |
| 4.2.9 饮水量多 |
| 4.2.10 活动量多 |
| 4.3 不足及展望 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 攻读学位期间参与的课题 |
| 致谢 |
（4）输尿管支架细菌生物膜观察及病原菌分布和耐药性（论文提纲范文）
| 文章快速阅读： |
| 文章特点— |
| 文题释义： |
| 0引言Introduction |
| 1 对象和方法Subjects and methods |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间及地点 |
| 1.3 对象 |
| 1.4 材料 |
| 1.5 实验方法 |
| 1.5.1 扫描电镜观察细菌生物膜 |
| 1.5.2 菌株鉴定及药敏分析 |
| 1.6 主要观察指标 |
| 1.7 统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1 实验流程见图1。 |
| 2.2 输尿管支架表面细菌生物膜形态特征 |
| 2.3 细菌生物膜阳性率 |
| 2.4 生物膜菌株分布 |
| 2.5 耐药性分析结果 |
| 3 讨论Discussion |
（5）云南彝族人群特发性低枸橼酸尿症与VDR基因SNP的关联研究及VDR基因甲基化检测（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一部分：VDR基因SNP位点rs2228570、rs7975232、rs731236、rs1544410、rs10783218、rs3847987与云南彝族人群特发性低枸橼酸尿症的关联研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分：5例样本VDR基因三个片段预实验Sequenom MassARRAY质谱甲基化检测 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（6）大鼠肾结石模型肾组织中自噬相关蛋白、自噬体及尿液中Tamm-Horsfall蛋白的检测与意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分:大鼠肾结石模型肾组织中自噬相关蛋白、自噬体的检测与意义 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分:大鼠肾结石模型尿液中Tamm-Horsfall蛋白的变化与意义 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略词对照表 |
| 致谢 |
| 氧自由基、炎症反应与肾结石形成的研究进展综述 |
| 参考文献 |
（7）骨桥蛋白基因多态性与特发性草酸钙结石的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.1.1 对象来源 |
| 2.1.2 结石组和对照组的入选及排除标准 |
| 2.1.3 问卷调查 |
| 2.2 主要试剂和溶液配制 |
| 2.2.1 主要试剂 |
| 2.2.2 主要溶液配制 |
| 2.3 主要仪器和设备 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.4.1 标本采集及保存方法 |
| 2.4.2 结石成份分析 |
| 2.4.3 外周血基因组 DNA 提取和保存 |
| 2.4.4 血基因组 DNA 浓度、纯度测定及验证 |
| 2.4.5 尿液钙离子浓度的测定 |
| 2.4.6 SNP 位点的选择 |
| 2.4.7 实时荧光定量 PCR TaqMan-MGB 探针法工作原理和方法 |
| 2.4.8 测序法验证基因型 |
| 2.5 统计学分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 研究对象一般临床资料 |
| 3.2 OPN 基因多态性的检测结果 |
| 3.3 OPN 基因 SNP 位点基因测序 |
| 3.3.1 OPN 基因 SNP 位点普通 PCR 扩增产物电泳结果 |
| 3.3.2 OPN 基因 SNP 位点测序结果 |
| 3.4 HARDY-WEINBERG 遗传平衡吻合度检验 |
| 3.5 OPN 基因型与 ICS 的相关性 |
| 3.6 OPN 多态性位点基因型与表型的相关性 |
| 3.7 OPN 基因单体型分析 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（8）静脉注射草酸钾对犬肾功能、组织结构及钙转运相关蛋白的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 文献综述 |
| 1 尿结石研究进展 |
| 1.1 尿结石流行病学 |
| 1.2 尿结石发病因素 |
| 2 尿结石的诊治 |
| 2.1 诊断 |
| 2.2 治疗 |
| 3 尿结石的成石机理 |
| 3.1 尿结石的类型及组成成分 |
| 3.2 草酸钙结石研究概况 |
| 参考文献 |
| 第一部分 犬肾草酸盐沉积模型的建立 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂和材料 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 试剂的配制 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 样品采集 |
| 1.6 样品检测及方法 |
| 1.7 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 临床表现和肾脏病理变化 |
| 2.2 尿液检查结果 |
| 2.3 血清生化结果 |
| 2.4 超声检查结果 |
| 2.5 病理组织学检查结果 |
| 2.6 扫描电镜检查结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 肾草酸盐沉积型中犬肾组织结构的病理学变化 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂和材料 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 试剂的配制 |
| 1.4 组织样品采集 |
| 1.5 组织结构观察 |
| 2 结果 |
| 2.1 PAS染色结果 |
| 2.2 HE联合Pizzolato’s 染色结果 |
| 2.3 肾脏超微结构变化 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 肾草酸盐沉积对犬肾中TRPV5、NCX1、Calbindin-D28k表达的影响研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物分组和处理 |
| 1.2 主要材料和仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 相关试剂的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 切片的制作 |
| 2.2 IHC 检测组织中 TRPV5、NCX1、Calbindin-D28k 蛋白表达 |
| 2.3 钙转运相关基因mRNA的表达的检查 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（9）尿血管紧张素原（uAGT）在儿童梗阻性肾积水中的检测及其意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 尿液生物学诊断在先天性肾积水中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历及在学期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（10）尿exosomes的提取和鉴定及其在糖尿病肾病研究中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 尿exosomes提取方法的优化 |
| 1 方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 健康志愿者 |
| 1.3 超速离心法提取尿exosomes |
| 1.4 纳米膜浓缩法提取尿exosomes |
| 1.5 透射电子显微镜观察扫描 |
| 2 结果 |
| 2.1 尿exosomes的鉴定 |
| 2.2 两种尿exosomes提取方法的比较 |
| 3 讨论 |
| 第二章 尿液exosome标本收集方法的优化 |
| 1 方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 参与者 |
| 1.3 样本处理 |
| 1.4 凝胶电泳SDS-PAGE |
| 1.5 银染 |
| 1.6 Western blot检测TSG101 |
| 2 结果 |
| 2.1 Bradford法蛋白浓度测定 |
| 2.2 添加蛋白酶抑制剂组聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝色 |
| 2.3 不添加蛋白酶抑制剂组银染 |
| 2.4 Western blot检测TSG101 |
| 3 讨论 |
| 第三章 尿exosomes提取技术在糖尿病肾病研究中的应用 |
| 1 方法 |
| 1.1 实验设计 |
| 1.2 材料、试剂与仪器 |
| 1.3 参与者 |
| 1.4 样本处理 |
| 1.5 凝胶电泳SDS-PAGE |
| 1.6 Western blot检测TSG101 |
| 2 结果 |
| 2.1 NanoSight观察到的exosomes的形态和数量 |
| 2.2 蛋白浓度比较 |
| 2.3 各组混合样品蛋白模式图 |
| 3 讨论 |
| 第四章 蛋白组学技术用于寻找糖尿病肾病尿exosomes中的生物标记物 |
| 1 方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 参与者 |
| 1.3 样本处理 |
| 1.4 双向凝胶电泳 |
| 1.5 分析胶的成像及图像分析 |
| 1.6 制备胶的制作及处理 |
| 1.7 质谱鉴定前的处理 |
| 1.8 质谱鉴定 |
| 1.9 生物信息学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 分析胶蛋白成像 |
| 2.2 质谱鉴定发现的差异蛋白 |
| 2.3 生物信息学分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 成果 |
| 附录1 英文缩略词对照表 |
| 附录2 发表论文 |
| 致谢 |
| 统计学证明 |
四、Tamm-Horsfall蛋白与泌尿系疾病的关系（论文参考文献）
- [1]排石清对大鼠泌尿系感染性结石防治效果的实验研究[D]. 路鑫. 南京中医药大学, 2021(01)
- [2]乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall蛋白表达的影响[D]. 方道成. 贵州医科大学, 2020(04)
- [3]现阶段膀胱结石成分及危险因素分析[D]. 张坚. 南华大学, 2020(01)
- [4]输尿管支架细菌生物膜观察及病原菌分布和耐药性[J]. 张家模,张翾,罗华铭,赵涛,陈江川,刘娟,王科. 中国组织工程研究, 2020(16)
- [5]云南彝族人群特发性低枸橼酸尿症与VDR基因SNP的关联研究及VDR基因甲基化检测[D]. 李心. 昆明医科大学, 2019(06)
- [6]大鼠肾结石模型肾组织中自噬相关蛋白、自噬体及尿液中Tamm-Horsfall蛋白的检测与意义[D]. 刘鑫. 西南医科大学, 2017
- [7]骨桥蛋白基因多态性与特发性草酸钙结石的相关性研究[D]. 肖观称. 南昌大学, 2014(01)
- [8]静脉注射草酸钾对犬肾功能、组织结构及钙转运相关蛋白的影响[D]. 关华伟. 扬州大学, 2014(01)
- [9]尿血管紧张素原（uAGT）在儿童梗阻性肾积水中的检测及其意义[D]. 院恩萌. 郑州大学, 2014(02)
- [10]尿exosomes的提取和鉴定及其在糖尿病肾病研究中的应用[D]. 谷东风. 南方医科大学, 2014(01)